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技術(shù)文章

大鼠腦立體定位儀實驗操作指導(dǎo)

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 先了解下某些顱外標記與顱內(nèi)結(jié)構(gòu)具有相對固定的位置關(guān)系。
1.前囟(bregma):位于冠狀縫和矢狀縫的交接處
2.人字縫尖(ambda):位于后囟人字縫與矢狀縫交會點

儀器使用所需材料:
大鼠,立體定位儀,哺乳類手術(shù)器械,牙科鉆,20%氨基甲酸乙酯,生理鹽水,2%滂胺天藍溶液
測試方法:
麻醉:20%氨基甲酸乙酯0.6 ml/100g, i.p.
固定:將大鼠頭部固定于腦立體定位儀.上,門齒桿-3.3mm ;3個標準檢測是否固定成功(鼻對正中,頭部不動,提尾不掉);切頭皮,剝開皮下組織,將骨縫暴露清晰,用鉛筆在前囟和后囟各做一-標志.;核團定位,做標志,鉆孔;LV(AP: -1.3 R 2.0 H: 3.5)mm
小心安 放微量注射器,針尖斜面中點進入孔內(nèi)時,記高度。緩慢進針至LV ,注入10 μl 2%滂胺天藍溶液(2 μl/min),留針10 min后緩慢拔針
確定注射位置:
取下動物,腹腔注射過量的20%氨基甲酸乙酯使動物死亡。
以咬骨鉗咬開顱骨,小心取出大腦,順著注射點將大腦切開,觀察染料是否在側(cè)腦室內(nèi)

需要注意的是:
■立體定位儀為精密儀器,實驗時應(yīng)小心操.作,以免損壞
■微量注射器取出后應(yīng)立即清洗,以防堵塞
 
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